1. A GYÓGYSZER MEGNEVEZÉSE
LEUCO-SCINT készlet radioaktív gyógyszerkészítményhez
2. MINŐSÉGI ÉS MENNYISÉGI ÖSSZETÉTEL
LEUCO-SCINT jelző ampulla összetétele:
1 ampulla tartalma:
Hatóanyag:
d,l-Exametazim 0,18 mg
A segédanyagok teljes listáját lásd a 6.1 pontban.
3. GYÓGYSZERFORMA
Készlet radioaktív gyógyszerkészítményhez
Radiogyógyszer készlet technécium Tc-99m d,l-Exametazim készítéséhez.
A Leuco-Scint készlet tartalma:
Por oldatos injekcióhoz.
Steril, pirogénmentes liofilizált fehér por nitrogén atmoszférában lezárva, amelyet oxidálószermentes nátrium-pertechnetát Tc-99m injekcióval (Ph. Eur.) jelezni kell ahhoz, hogy diagnosztikus vizsgálatot lehessen végezni
A készlet tartalmaz még steril, pirogénmentes antikoaguláns oldatot és steril, pirogénmentes szedimentáló ágens oldatot.
4. KLINIKAI JELLEMZŐK
4.1 Terápiás javallatok
Ez a gyógyszer kizárólag diagnosztikai célra alkalmazható.
A betegtől levett vérből aszeptikus körülmények között szeparált fehérvérsejtek 99mTc-pertechnetát steril oldattal történő jelzését követően és a betegbe történő visszainjektálása után a következő vizsgálatokra alkalmas:
A szervezetben zajló gyulladásos folyamatok kimutatása (fehérvérsejt migráció alapján)
- bakteriális fertőzés
- tályog
- a bélrendszer, vagy a csontok, ízületek gyulladásos elváltozásai esetén
4.2 Adagolás és alkalmazás
Adagolás: Egy üveg liofilizátum jelzéséhez 950-1000 MBq steril 99mTc-Nátrium-pertechnetát oldatot használunk 1,5 ml térfogatban.
Alkalmazás módja: intravénásan, a szedimentálódott fehérvérsejtek jelzését követő 30 percen
belül. A felvétel javasolt időpontja: az injektálást követő 1., 2., 3., és 4 . órában.
Javasolt aktivitás: 200-250 MBq
4.3 Ellenjavallatok
Ismert ellenjavallatok nincsenek.
4.4 Különleges figyelmeztetések és az alkalmazással kapcsolatos óvintézkedések
Csak megfelelően szakképzett személy foglalkozhat radiofarmakonok jelzésével. Az ampulla tartalmát csak 99mTc-LEUCO-SCINT előállítására szabad felhasználni és tilos a betegnek beadni anélkül, hogy az izotópot nem adták hozzá.
Csak olyan 99mTc generátorból származó elutumot szabad felhasználni, amelyet 24 órán belül már megfejtek, illetve 2 óránál nem hosszabb időpontban történt az elutum fejése.
A radioaktív gyógyszereket nagyon gondosan, a biztonsági előírásokat betartva szabad használni, hogy így csökkentsük a klinikai személyzet sugárterhelését.
A kit tartalma a felhasználás előtt nem radioaktív, de a 99mTc-nátrium pertechnetát steril injekció hozzáadása után a megfelelő sugárvédelmi eszközök használata kötelező.
A radiogyógyszer készlet steril, pirogénmentes, ezért követni kell a szigorúan aszeptikus eljárás előírásait.
A páciensnek a készítmény beadása előtt és után nagyon sok folyadékot kell innia, ezzel elősegítve a folyadék kiválasztását, mellyel a sugárdózis csökkenthető.
A fehérvérsejtek szeparálása és jelzése aszeptikus körülmények között történjen. A szedimentálódott fehérvérsejtek felületéről a lehető legteljesebb mértékben el kell távolítani a plazmát, mert az erősen csökkenti a fehérvérsejtek jelzési hatásfokát. A jelzést azonnal el kell végezni és a jelzett leukocitákat 30 percen belül reinjektálni.
4.5 Gyógyszerkölcsönhatások és egyéb interakciók
Más gyógyszerekkel való kölcsönhatásokról eddig nem számoltak be.
4.6 Terhesség és szoptatás
Reprodukciós korban lévő nőknél végzett vizsgálatok:
Ha reprodukciós korban lévő nőknél kell alkalmazni a radiofarmakont, mindig tájékozódni kell az esetleges terhességről. Ezeket a nőket mindig terhesnek kell tekinteni, ha kimarad egy menstruációs ciklus mindaddig, míg az ellenkezője be nem bizonyul. Ha bizonytalan a helyzet, akkor a beteget minimális expozíciónak szabad csak kitenni, annak érdekében, hogy megfelelő klinikai információhoz jussunk. Egyéb vizsgálati módszerek alkalmazását, melyek nem kapcsolatosak az ionizáló sugárzással, ezeknél a nőknél mindig mérlegelni kell.
Terhesség
Humán terhesség esetén való alkalmazásra nincsenek adatok. Nem végeztek állatkísérleteket sem ezen a téren. Terhes nőkön végzett izotópdiagnosztikai vizsgálatok során a magzatot is éri az adott sugárdózis. Ezért csak olyan sürgős vizsgálatot lehet elvégezni terhesség alatt, amelynél a vizsgálatból származó információ értéke meghaladja az anyát és a magzatot érhető károsodás kockázatát.
Szoptatás
Mielőtt szoptatós anyának radioaktív gyógyszert adnánk, mérlegelni kell, hogy az elvégzendő vizsgálatot a szoptatás utáni időszakra lehet-e halasztani, vagy pedig a legalkalmasabb radiofarmakont kell kiválasztani, gondolva arra, hogy a radioaktív anyag kiválasztódik az anyatejbe. Ha a radioaktív gyógyszer használata mégis szükségszerű, a szoptatást 12 órára fel kell függeszteni, és a lefejt anyatejet nem szabad felhasználni. A szoptatást abban az esetben lehet elkezdeni, ha az anyatejben lévő radioaktivitás szintje nem eredményez a magzat számára 1 mSv-nél nagyobb sugárdózist.
4.7 A készítmény hatásai a gépjárművezetéshez és gépek kezeléséhez szükséges képességekre
A radioaktív gyógyszer alkalmazása nem befolyásolja a beteg gépjárművezetési és gépkezelési tevékenységét.
4.8 Nemkívánatos hatások, mellékhatások
Nagyon kevés esetben észleltek enyhe csalánkiütésszerű túlérzékenységi reakciót a nem stabilizált technetium[99mTc] exametazim készítmény intravénás adagolását követően.
Minden egyes vizsgálat során a beteg sugárterhelésnek van kitéve, ez a valószínűsített előny alapján indokolt kell legyen. Az aktivitás mennyiségének olyannak kell lenni, hogy a sugárdózis az elérhető legkevesebb legyen, szemmel tartva az elérni kívánt diagnózishoz szükséges mennyiséget.
Az ionizációs sugárzásnak való kitétel összefüggésben áll rákindukcióval és potenciális örökletes hibák kialakulásával. A diagnosztizált nukleáris medicina vizsgálatok során a jelenlegi bizonyítékok azt sugallják, hogy ilyen mellékhatások ritkán jelentkeznek radiofarmakon kis akivitása miatt.
Minden betegnél a valószínű hasznos információ alapján kell mérlegelni az ionizáló sugárzásból eredő expozíciót. A beadott aktivitásnak annyinak kell lennie, hogy az abból eredő sugárdózis minél alacsonyabb legyen, szem előtt tartva az elérhető diagnosztikai eredményt.
A legtöbb diagnosztikus vizsgálathoz, amelyben nukleáris eljárást használnak, a sugárterhelés (EDE) kevesebb, mint 20 mSv. Ennél magasabb dózis indokolt lehet néhány klinikai körülménynél.
4.9 Túladagolás
A LEUCO-SCINT kittel végzett állatkísérletek eredményei szerint túladagolás veszélye nem áll fenn.
Abban az esetben, ha radiációs túladagolás történne, a beteg által elnyelt dózis csökkenthető a vizelet és székletürítés gyakoriságának fokozásával.
5 FARMAKOLÓGIAI TULAJDONSÁGOK
5.1 Farmakodinámiás tulajdonságok
Farmakoterápiás csoport: Radioaktív diagnosztikumok
ATC kód: V09AA02
A 99mTc-LEUCO-SCINT diagnosztikai célra alkalmazott dózisánál nincs farmakodinámiás hatás.
5.2 Farmakokinetikai tulajdonságok
A LEUCO-SCINT készlet hatóanyaga a d,l-Exametazim ligandum lipofil anyag, amely neutrális komplexet képez a 99mTc-mal.
A lipofil komponens nagyon gyorsan átjut a sejtek membránján, azt követően pedig egy sejten belüli kölcsönhatás következtében hidrofil átalakuláson megy keresztül. Az így keletkezett hidrofil komplex már nem tud kidiffundálni a sejtekből a membránon keresztül („csapdába esik”), nem jut vissza a véráramba.
[99mTc]-technéciummal jelzett leukuciták a májba (5 percen belül), a lépbe (40 percen belül), valamint a vérkeringésbe kerülnek. Ez utóbbi mintegy 50%-át veszi fel a jelzett leukocitáknak.Körölbelül 37%-a a jelzett sejteknek 40 perccel az injektálás után visszanyerhető a vérkeringésből. [99mTc]-technécium aktivitása lassan kiürül a sejtekből és kiválasztódik részben a veséken, részben a májon keresztül az epehólyagba. Ezek a belek radioaktivitásának növekedését eredményezik.
5.3 A preklinikai biztonságossági vizsgálatok eredményei
A hagyományos – farmakológiai biztonságossági, ismételt dózistoxicitási, genotoxicitási, karcinogenitási, reprodukciós toxicitási – vizsgálatokból származó nem klinikai jellegű adatok azt igazolták, hogy a készítmény nem jelent különleges veszélyt az emberre.
A 99mTc-LEUCO-SCINT toxicitás vizsgálata során megállapítottuk, hogy egyszeri adás után toxikus tünetek nem fordulnak elő, még ismételt dózisú toxicitás vizsgálatnál a maximális humán dózis sokszoros adagja sem okozott elváltozást patkányokon.
A preklinikai vizsgálatok során végzett szövettani eredmények sem mutattak kóros elváltozásokat laboratóriumi kísérleti állatokon.
A gyógyszer mutagén, teratogén és karcinogén hatásairól az irodalomban sem számoltak be.
6 GYÓGYSZERÉSZETI JELLEMZŐK
6.1 Segédanyagok felsorolása
Ón-klorid-dihidrát
Nátrium-pirofoszfát-dekahidrát.
6.2 Inkompatibilitások
A nátrium pertechnetát 99mTc steril injekcióval történő jelölési reakció függ az ónszint redukált állapotban való fenntartásától. Ezért oxidálószereket tartalmazó nátrium pertechnetát Tc-99m injekciót nem szabad alkalmazni.
6.3 Felhasználhatósági időtartam
A készlet a gyártástól számított 1 évig, a készlet dobozán feltüntetett időpontig használható fel.
A jelzett fehérvérsejteket, a jelzést követően azonnal, de minimum 30 percen belül reinjektálni kell.
A jelzett készítményt a jelzés időpontjától számított 30 percen belül fel kell használni.
6.4 Különleges tárolási előírások
A készlet a fénytől való védelem érdekében az eredeti csomagolásban és 2-8 oC-on tárolandó. Oxidálószerektől védve kell tartani.
A jelzett termék legfeljebb 25 oC-on, vagy ez alatti hőmérsékleten, fénytől védve tárolandó.
A jelzett termék tárolása során a hatályos védekezési és biztonsági előírásokat be kell tartani.
A készletben lévő üveg tartalma csak a 99mTc-technécium jelzett injekció előállítására használható fel az alkalmazási előírásnak megfelelően.
A radioaktív gyógyszert csak olyan orvos, vagy megfelelően képzett személy használhatja fel, akinek megfelelő képzettsége és tapasztalata van a radionuklidok kezelésében és a hatályos védekezési és biztonsági előírások betartásában.
6.5 Csomagolás típusa és kiszerelése
3 üveg LEUCO-SCINT
nitrogén atmoszférában lezárt steril, pirogénmentes liofilizátum 6 és 15 ml-es, 1-es típusú boroszilikát üvegből (Ph. Eur.) készült injekciós üvegben, gumidugóval és rollnizott aluminium kupakkal lezárva.
3 üveg ACD-A
antikoaguláns, steril, pirogénmentes 10 ml üvegenként.
3 üveg Plasmasteril (plasmaexpander)
szedimentáló ágens, steril, pirogénmentes 15 ml üvegenként.
6.6 A megsemmisítésre vonatkozó különleges óvintézkedések
Bármilyen fel nem használt készítmény, illetve hulladékanyag megsemmisítését a helyi előírások szerint kell végrehajtani.
Megjegyzés:
Osztályozás: II./3 csoport
Korlátozott érvényű orvosi rendelvényhez kötött, az egészségügyről szóló 1997. évi CLIV. Törvény 3. §-ának ga) pontja szerinti rendelőintézeti járóbeteg-szakellátást vagy fekvőbeteg-szakellátást nyújtó szolgáltatók által biztosított körülmények között alkalmazható gyógyszer (I).
7 A FORGALOMBA HOZATALI ENGEDÉLY JOGOSULTJA
Neve és címe: MEDI-RADIOPHARMA Kft.
H-2003 Érd
Szamos u. 10-12.
Tel.: 06-23-521-261
Fax: 06 23-521 260
E-mail: mediradiopharma-kft @mediradiopharma.hu
8 A FORGALOMBA HOZATALI ENGEDÉLY SZÁMA(I)
OGYI-T-8734/01
9
10 A FORGALOMBA HOZATALI ENGEDÉLY ELSŐ KIADÁSÁNAK/MEGÚJÍTÁSÁNAK DÁTUMA
Az első engedélyezés időpontja: 1992. 07. 16.
Az engedély megújításának időpontja: 2003. 01. 14.
11 A SZÖVEG ELLENŐRZÉSÉNEK DÁTUMA
2008. december 12.
11. VÁRHATÓ SUGÁRTERHELÉS
A [99mTc]-technécium gamma sugárzás kibocsátással 140 keV energiával bomlik, 6 óra felezési idővel stabil technecium-99 re.
A 99mTc-HM-PAO intravénás alkalmazása esetén a 70 kg testsúlyú beteg szerveit, illetve szöveteit ért sugárdózis értékeket az alábbi táblázatok mutatják be.
Felnőtt és gyermek esetében
|
Elnyelt dózis |
||||||
|
Szervek |
Felnőtt mGy/MBq |
15 éves mGy/MBq |
10 éves mGy/MBq |
5 éves mGy/MBq |
1 éves mGy/MBq |
újszülött mGy/MBq |
|
mellékvese |
9.86E-03 |
1.22E-02 |
1.75E-02 |
2.36E-02 |
3.73E-02 |
7.46E-02 |
|
agy |
2.09E-03 |
2.67E-03 |
3.94E-03 |
6.25E-03 |
1.11E-02 |
2.53E-02 |
|
mell |
2.31E-03 |
2.83E-03 |
4.54E-03 |
6.99E-03 |
1.21E-02 |
2.75E-02 |
|
epehólyag fala |
9.50E-03 |
1.14E-02 |
1.71E-02 |
2.70E-02 |
3.88E-02 |
7.90E-02 |
|
felsővastagbél fal |
4.10E-03 |
5.28E-03 |
8.07E-03 |
1.10E-02 |
1.80E-02 |
3.40E-02 |
|
alsóvastagbél fal |
5.21E-03 |
6.56E-03 |
9.52E-03 |
1.57E-02 |
2.45E-02 |
4.89E-02 |
|
vékonybél |
5.04E-03 |
6.24E-03 |
1.48E-02 |
1.40E-02 |
2.23E-02 |
4.54E-02 |
|
gyomor |
8.55E-03 |
1.01E-02 |
1.03E-02 |
2.08E-02 |
3.24E-02 |
6.42E-02 |
|
szív fala |
5.37E-03 |
6.54E-03 |
9.46E-03 |
1.34E-02 |
2.24E-02 |
4.45E-02 |
|
vese |
9.50E-03 |
1.16E-02 |
1.71E-02 |
2.39E-02 |
3.63E-02 |
7.00E-02 |
|
máj |
2.40E-02 |
3.08E-02 |
4.52E-02 |
6.31E-02 |
1.13E-01 |
2.41E-01 |
|
tüdő |
4.98E-03 |
6.36E-03 |
8.89E-03 |
1.29E-02 |
2.16E-02 |
4.41E-02 |
|
izom |
3.43E-03 |
4.30E-03 |
6.26E-03 |
9.24E-03 |
1.58E-02 |
3.44E-02 |
|
petefészek |
3.98E-03 |
4.96E-03 |
7.08E-03 |
1.00E-02 |
1.51E-02 |
2.95E-02 |
|
hasnyálmirigy |
1.42E-02 |
1.73E-02 |
2.46E-02 |
3.54E-02 |
5.44E-02 |
1.04E-01 |
|
vöröscsontvelő |
1.85E-02 |
2.09E-02 |
3.30E-02 |
6.09E-02 |
1.21E-01 |
3.96E-01 |
|
csontfelszín |
1.41E-02 |
1.58E-02 |
2.52E-02 |
4.08E-02 |
6.01E-02 |
1.18E-01 |
|
bőr |
1.86E-03 |
2.25E-03 |
3.58E-03 |
5.71E-03 |
1.03E-02 |
2.40E-02 |
|
lép |
1.57E-01 |
2.22E-01 |
3.34E-01 |
5.12E-01 |
9.11E-01 |
2.36E+00 |
|
here |
1.73E-03 |
2.25E-03 |
3.43E-03 |
5.43E-03 |
9.50E-03 |
2.18E-02 |
|
csecsemőmirigy |
2.99E-03 |
3.64E-03 |
5.10E-03 |
7.58E-03 |
1.30E-02 |
2.77E-02 |
|
pajzsmirigy |
2.40E-03 |
3.00E-03 |
4.53E-03 |
7.16E-03 |
1.24E-02 |
2.74E-02 |
|
hólyag fala |
2.80E-03 |
3.81E-03 |
5.71E-03 |
8.44E-03 |
1.40E-02 |
2.84E-02 |
|
méh |
3.36E-03 |
4.18E-03 |
8.22E-03 |
1.20E-02 |
1.94E-02 |
2.90E-02 |
|
egésztest |
5.03E-03 |
6.23E-03 |
9.43E-03 |
1.42E-02 |
2.41E-02 |
5.38E-02 |
|
EDE (mSv/MBq) |
1.75E-02 |
2.31E-02 |
5.36E-02 |
5.36E-02 |
9.41E-02 |
2.40E-01 |
A dózis kalkuláció a standard MIRD módszerrel (MIRD Pamphlet No.1 Society of Nuclear Medicine, 1976) történt. Az Effektív Dózisegyenérték (EDE) értékének megadása az ICRP 53-ban leírtak alapján történt (Ann. ICRP 18 (1-4), 1988).
Terhes nők esetében
|
Elnyelt dózis |
||||
|
Szervek |
Nő mGy/MBq |
3 hónapos mGy/MBq |
6 hónapos mGy/MBq |
9 hónapos mGy/MBq |
|
mellékvese |
1.20E-02 |
1.20E-02 |
1.20E-02 |
1.20E-02 |
|
agy |
2.55E-03 |
2.57E-03 |
2.42E-03 |
2.43E-03 |
|
mell |
2.77E-03 |
2.78E-03 |
2.84E-03 |
2.84E-03 |
|
epehólyag fala |
1.13E-02 |
1.11E-02 |
1.13E-02 |
1.11E-03 |
|
felsővastagbél fal |
4.83E-03 |
4.55E-03 |
3.26E-03 |
3.00E-03 |
|
alsóvastagbél fal |
6.16E-03 |
5.70E-03 |
3.69E-03 |
2.69E-03 |
|
vékonybél |
5.71E-03 |
5.60E-03 |
3.33E-03 |
3.23E-03 |
|
gyomor |
9.84E-03 |
9.60E-03 |
6.09E-03 |
1.15E-02 |
|
szív fala |
6.42E-03 |
6.42E-03 |
1.01E-02 |
1.00E-02 |
|
vese |
1.12E-02 |
1.12E-02 |
6.23E-03 |
6.23E-03 |
|
máj |
3.05E-02 |
3.04E-02 |
1.10E-02 |
1.09E-02 |
|
tüdő |
6.29E-03 |
6.30E-03 |
3.05E-02 |
3.05E-02 |
|
izom |
4.08E-03 |
4.05E-03 |
5.90E-03 |
5.92E-03 |
|
petefészek |
4.41E-03 |
4.03E-03 |
3.94E-03 |
3.74E-03 |
|
hasnyálmirigy |
1.71E-02 |
1.70E-03 |
4.88E-03 |
4.32E-03 |
|
vöröscsontvelő |
1.72E-03 |
1.72E-03 |
1.69E-02 |
1.72E-03 |
|
csontfelszín |
1.38E-02 |
1.37E-02 |
1.37E-02 |
1.37E-02 |
|
bőr |
2.19E-03 |
2.19E-03 |
2.14E-03 |
2.14E-03 |
|
lép |
1.86E-01 |
1.86E-01 |
1.86E-01 |
1.86E-01 |
|
here | ||||
|
csecsemőmirigy |
3.48E-03 |
3.50E-03 |
3.35E-03 |
3.35E-03 |
|
pajzsmirigy |
2.58E-03 |
2.60E-03 |
2.57E-03 |
2.56E-03 |
|
hólyag fala |
3.35E-03 |
2.91E-03 |
2.12E-03 |
2.09E-03 |
|
méh |
3.72E-03 |
2.87E-03 |
2.96E-03 |
3.01E-03 |
|
magzat |
2.80E-03 |
2.83E-03 |
2.68E-03 |
|
|
placenta |
2.75E-03 |
2.26E-03 |
||
|
egésztest |
5.93E-03 |
5.90E-03 |
5.68E-03 |
5.62E-03 |
|
EDE (mSv/MBq) |
2.03E-02 |
2.02E-02 |
2.03E-02 |
2.02E-02 |
A dózis kalkuláció a standard MIRD módszerrel (MIRD Pamphlet No.1 Society of Nuclear Medicine, 1976) történt. Az Effektív Dózisegyenérték (EDE) értékének megadása az ICRP 53-ban leírtak alapján történt (Ann. ICRP 18 (1-4), 1988).
12 RADIOAKTÍV GYÓGYSZEREK ELKÉSZÍTÉSÉRE VONATKOZÓ ÚTMUTATÁSOK
A minőségellenőrzés célja egyrészt a 99mTc-Exametazim lipofil komplex mennyiségének, valamint a radioaktív szennyezők, azaz a szabad 99mTc-pertechnetát, a redukált és hidrolizált 99mTc és a hidrofil 99mTc-HM-PAO komplex mennyiségének meghatározása, másrészt a sejtjelzés hatásfokának ellenőrzése. A lipofil 99mTc-HM-PAO komplex mennyisége 30 percen belül nem lehet kevesebb, mint 80%, valamint a radioaktív szennyezők összmennyisége nem haladhatja meg a 20%-ot. A leukociták jelzési hatásfoka, a jelzést követő 30 percen belül a hozzáadott 99m-Tc-HM-PAO összaktivitásának százalékában 50-55%. A reszuszpendált sejtek aktivitásának több mint 90%-a sejtekhez kötött aktivitás.
Leukocita szeparálás
1. 4 db 2 ml ACD-A-t és 3 ml Plasmasterilt tartalmazó 20 ml-es műanyag fecskendőbe vastag vérvételi tűvel egyenként 15-15 ml, összesen 60 ml vénás vért veszünk a betegtől.
2. A dugattyú továbbhúzásával és a fecskendő óvatos átforgatásával a benne lévő oldatokkal a vért óvatosan elegyítjük, majd főzőpohárba téve, a fecskendőt dugattyús felére állítva hagyjuk szobahőn szedimentálódni. Addig várunk, amíg a leüllepedett vörösvértestek és a felülúszó aránya kb. fele-fele nem lesz (30 perc).
3. A felülúszót (trombocitában, leukocitában gazdag plazma, mely kevés vörösvértestet tartalmaz) egy szögben meghajlított tűn át (18 G 1 1/2) óvatosan steril centrifugacsőbe nyomjuk, és 150 g-n 10 percig centrifugáljuk.
4. A leüllepedett sejtekről a felülúszót (trombocitákban gazdag plazma) steril Pasteur pipettával eltávolítjuk, és félretesszük a jelzett sejtek mosásához, illetve a reinjektáláshoz. A szedimentálódott fehérvérsejtek felületéről a lehető legteljesebb mértékben el kell távolítani a plazmát, mert az erősen csökkenti a fehérvérsejtek jelzési hatásfokát.
5. A jelzést azonnal el kell végezni és a jelzett leukocitákat 30 percen belül reinjektálni.
LEUCO-SCINT jelzése 99m-Tc-mal
1. Helyezzük a HM-PAO tartalmú ampullát ólomkonténerbe és injektáljunk bele 1,5 ml, fiziológiás sóval hígított 950-1000 MBq 99mTc-Na-pertechnetátot, majd a fecskendőbe szívjunk vissza 1,5 ml levegőt a túlnyomás elkerülése végett. A jelzéshez használt izotóp friss legyen, lehetőleg a generátorból való levételt követő 2 órán belül használjuk fel.
2. Fordítsuk fel néhányszor az ampullát a teljes oldódás érdekében és hagyjuk szobahőn jelződni 10 percig.
A leukocita jelzése 99m-Tc-HM-PAO-val
1. A szeparált plazmamentes leukocitákhoz hozzáadjuk óvatos keveréssel az előzőekben leírt módon jelzett 99m-Tc-HM-PAO-t és szobahőn inkubáljuk 10 percig.
2. Hozzáadunk 3 ml előzőleg félretett felülúszót és centrifugáljuk 150 g-vel 10 percig.
3. A centrifugálás után szétválasztjuk a sejtet a felülúszótól, a sejtre ismét 3 ml felülúszót téve reszuszpendáljuk azt, majd mérjük az aktivitását.
A leukociták jelzési hatásfoka a hozzáadott 99m-Tc-HM-PAO összaktivitásának százalékában 50-55% a jelzést követ 30 percen belül.
A reszuszpendált sejtek aktivitásának több mint 90%-a sejtekhez kötött aktivitás.
Minőségellenőrzés
A minőségellenőrzés során ellenőrizni kell:
1. A szeparált fehérvérsejtek életképességét
2. A fehérvérsejtek jelzéséhez használt HM-PAO-t tartalmazó LEUCO-SCINT készlet radiokémiai tisztaságát
A leukociták életképességének vizsgálata:
A leukociták életképessége tripán-kék(3,3,-3,3-dimetil-4,4,-bifenilén)bisz(5-amino-4-hidroxi-2,7-naftalin-szulfonsav tetranátrium sója) festékkel vizsgálható a következő módon:
1. A tripán-kék festék 0,2%-os desztillált vizes oldatát 4:1 arányban elegyítjük 4,25%-os natrium-klorid odattal.
2. Az így előállított oldatból 0,45 ml-t adunk a leukocita szuszpenzió 0,05 ml-es térfogatához, összerázzuk és azonnal Bürker-kamrába töltjük.
3. A festékoldat passzívan átdiffundál az elpusztult sejtek sejthártyáján, minek következtében azok kékesen elszíneződnek, szemben a natív élő sejtekkel.
4. A sejtek viabilitását a kékre színeződött, illetve natív sejtek %-os arányában adjuk meg. A fenti módszer alkalmazásával a leukociták több mint 90%-nak kell változatlan viabilitást mutatnia.
LEUCO-SCINT készlet minőségellenőrzése
Módszer:
I. oldószer extrakciós módszer
II. Felszálló vékonyréteg kromatográfia
I. oldószer extrakciós módszer
A jelzés ellenőrzését (radiokémiai tisztaság) szerves oldószer extrakciós módszerrel végezzük. Ezzel a módszerrel a lipofil 99mTc-LEUCO-SCINT mennyiségét határozzuk meg az összaktivitás %-ában kifejezve.
Anyagok és eszközök:
1. fiziológiás sóoldat
2. kloroform
3. Vortex mixer
4. dózis kalibrátor
5. extrakciós folyadék: 3 ml kloroform + 2.9 ml fiziológiás sóoldat.
6. üres ampullák a vizes és szerves oldószeres fázis szétválasztásához
7. fecskendő, tű, olló, csipesz
Kivitelezés:
1. A 99mTc-LEUCO-SCINT oldatból mérjünk 0,1 ml-t az extrakciós folyadékhoz.
2. Kevertessük az ampullát Vortex keverővel, majd hagyjuk állni 1-2 percig, hogy a fázisok szétváljanak
3. Szívjuk le a felül lévő vizes fázist fecskendővel egy másik ampullába.
4. A két fázis aktivitását határozzuk meg aktivitásmérő készülékkel. A lipofil 99mTc-MIBI komplex az alsó kloroformos fázisban található. A szabad pertechnetátot, a vizes fázisban találjuk.
5. A lipofil tartalom kiszámítása a következő képlet alapján történik:
A lipofil 99mTc-HM-PAO komplex mennyisége 30 percen belül nem lehet kevesebb, mint 80%, valamint a radioaktív szennyezők összmennyisége nem haladhatja meg a 20%-ot.
II. Felszálló vékonyréteg kromatográfia
Három féle radiokémiai szennyeződés lehet jelen az elkészített technetium-[99mTc] exametazim injekcióban. Ezek a következők: másodlagos technetium-[99mTc] exametazim komplex, szabad pertechnetát[99mTc] és redukált-hidrolizált technetium-[99mTc]. Két kromatográfiás rendszer kiértékelése szükséges ahhoz, hogy meghatározzuk az injekció radiokémiai tisztaságát.
Kivitelezés:
1. A mintákat tűvel helyezzük kb. 2,5 cm-re két TLC (szilikagéllel átitatott üveg rostszál kromatográfiás lemez) (2 cm x 20cm) kromatográfiás lemez aljától.
2. A lemezeket rögtön behelyezzük két előre elkészített felszálló kromatográfiás kifejlesztő edénybe.
3. Az egyikben metil-etil-keton (MEK), míg a másikban 0.9 %-os NaCl oldat van (1cm mély, friss oldatok). 15 cm kifejlesztés után a kromatogrammokat kiszedjük, megjelöljük a kifejlesztés határát, megszárítjuk és megmérjük az aktivitás eloszlást megfelelő műszerrel.
A kromatogram kiértékelése:
1-es Rendszer ITLC: MEK
A másodlagos technetium [99mTc]-exametazim komplex és a redukált-hidrolizált-technetium[99mTc]) a starton marad, Rf.: 0.0-0.1
A lipofil technetium[99mTc] exametazim komplex és a pertechnetát[99mTc] a frontra Rf.: 0.8-1.0 vándorol.
2-es Rendszer ITLC: 0,9%-os NaCl oldat
A lipofil technetium [99mTc] exametazim komplex és a másodlagos technetium[99mTc] exametazim komplex, valamint a redukált-hidrolizált-technetium[99mTc] starton marad. A pertechnetát [99mTc] a frontra Rf.: 0.8-1.0 vándorol.
Számítsuk ki mindkét aktivitást az össz aktivitás %-ban kifejezve amit a másodlagos technetium[99mTc] exametazim komplex és a redukált-hidrolizált-technetium[99mTc]-ból származik az 1-es rendszerből (A%).
Határozzuk meg az aktivitását a pertechnetát[99mTc] -nek a 2-es rendszerből.
A radiokémiai tisztaságot (a lipofil technetium-[99mTc] exametazim komplex %-a) a következő képlet adja:
100-(A%+B%),
ahol: A% jelenti a másodlagos technetium
[99mTc] exametazim komplex és a
redukált-hidrolizált-technetium[99mTc] értékét együttesen.
B% jelenti a pertechnetát [99mTc] mennyiségét.
30 percen belül legkevesebb 80%-os radiokémiai tisztaság várható a stabilizált termék elkészítése után.